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      概述

       

      滅菌,可稱為除去或殺滅物質中全部微生物。就一般滅菌方法來說,應根據微生物的種類、污染狀況、被污染物品的性質與狀態,對下述滅菌方法可單獨或合并使用,是否達到滅菌的目地,通常情況下要采用無菌試驗法進行判定。對滅菌操作時的溫度、壓力等是否適合滅菌的條件,必須得到十分的確認。在滅菌條件選定后,還要進行滅菌效果的確認,以保證使用的各種滅菌條件適合于要殺滅的目標菌。

       

      一、加熱滅菌法

       

      使用加熱滅菌法,在溫度和壓力等規定的滅菌條件下,要達到一定的加熱時間,因滅菌物品的性質、滅菌容器的容積大小各異,所以,滅菌時間是從容器內全部達到規定的溫度時開始計算。

       

      1、火焰滅菌法,是利用火焰加熱殺滅微生物的一種方法。本辦法以燃氣為主,用于磁制與金屬制口及在火焰中不會破損的物品。加熱時間通常在噴燈或酒精的火焰中加熱秒以上。

        

      2、干熱滅菌法,是利用干熱空氣加熱殺滅微生物的一種方法。本辦法以燃氣為主,用于磁制、金屬制若干物品、纖維制物品、礦物油、脂肪、脂肪油、試驗藥物、固態的醫藥品等耐高溫的物品,利用燃氣和電能直接加熱空氣,將加熱的空氣進行循環,保持干燥與高溫狀態。通常,在以下幾種條件下進行滅菌。135℃~145℃ 3~5小時;160℃~170℃ 2~4小時;180℃~200℃ 0.5~1小時;200℃以上0.5小時以上。在密封容器中裝入醫藥品、水容液等,這些物品屬耐高溫的物品,可用134℃~138℃的熱空氣,加熱3分鐘以上進行滅菌。   

       

      3、高壓蒸汽滅菌法,是利用適當溫度和壓力的飽和水蒸汽加熱殺滅微生物的一種方法。本辦法以燃氣為熱源,用于磁制、金屬制、橡膠制、紙制、纖維制的物品、水、培養基、試驗藥品、試驗液體和液態醫藥品等的滅菌,總之,用于耐高溫高壓水蒸汽的物品。為確實達到滅菌,滅菌容器中的原有空氣在操作中要從排氣中排除,進行滅菌時,高壓蒸汽必須飽滿。通??稍谝韵聴l件下進行滅菌。115℃(0.7kg/cm&sup2;)30分鐘;121℃(1.0kg/cm&sup2;)20分鐘;126℃(1.4kg/cm&sup2;)15分鐘。  

       

      4、流通蒸汽滅菌法,利用直接加熱的流通水蒸汽殺滅微生物的方法。本辦法以燃氣作為熱源,對磁制、金屬制、橡膠制、纖維制的物品、水、培養基、試驗藥品、試驗液和液狀的醫藥品等進行滅菌。用干熱滅菌法或高壓蒸汽滅菌法,物品有變質的危險,所以在100℃流通水蒸汽中滅菌需30~60分鐘。   

       

      5、煮沸滅菌法,利用沉沒在沸騰水中加熱殺滅微生物的一種方法。本辦法以燃氣為能源,對磁制、金屬制、橡膠制、纖維制的物品、水、培養基、試驗藥品、試驗液體、液狀的醫藥品等進行滅菌,用干熱滅菌法和高壓蒸氣滅菌法進行滅菌的物品有變質的危險。所以為增加殺菌效果,可以在沸騰水中加入1—2%的碳酸氫鈉。將物品沉入沸騰水中進行滅菌時,煮沸時間應在15分鐘以上。

       

      6、間歇滅菌法,是利用80℃~100℃水或流通水蒸氣,24小時為一周期,每隔30~60分鐘反復加熱3—5回;用來殺滅微生物的一種方法。用60℃~80℃的水反復加溫也是一種間歇式低溫滅菌方法。本辦法主要用于以橡膠為主的制品、培養基、試驗用藥品、液體和液態狀的醫藥等。

       

      二、過濾滅菌法

       

      過濾滅菌法即用篩除或濾材吸附等物理方式除去微生物,是一種常用的滅菌方法。對不耐熱液體,過濾是唯一實用的滅菌方法,濾器可分為深層型和過篩型兩大類。深層濾器主要靠濾材的深度,通過機械性捕獲或隨機吸附進行過濾,多數濾材屬此類型。有些需要滅菌的材料不能受熱,例如許多維生素溶液。因此,許多液體可以用過濾法來滅菌。過濾法不是將微生物殺死,而是把它們排除出去。目前過濾除菌采用兩類器具,一類叫深層濾器,例如用燒結玻璃、不上釉的陶瓷顆?;蚴迚撼傻臑V板等:另一類是濾膜。深層濾器已經使用了100年以上,現在有逐漸被濾膜取代的趨勢,但因為大量沉淀物容易堵塞濾膜,所以一般先用深層濾器除去大的顆粒。濾膜一般由醋酸纖維素、硝酸纖維素、多聚碳酸酯、聚偏氟乙烯等合成纖維材料制成。濾膜的孔徑一般為0.2微米,它可以濾除絕大多數微生物的營養細胞。過濾法的最大缺點是不能濾除病毒。本辦法主要用于氣體、水、含有可溶性、不穩定物質的培養基、試驗液體和液狀醫藥品等。通常使用的過濾裝置有膜過濾器,磁制過慮器、玻璃纖維過慮器等。

       

      三、照射滅菌法

       

      1、放射線滅菌法,包括放射性同位素在內的,利用從放射源產生γ射線進行照射,是殺滅微生物的一種方法。本辦法主要用于玻璃制品、磁制品、金屬制品、橡膠制品、塑料制品與纖維制品等耐受放射線照射的物品。通常使用的放射源有60CO、137C5等,根據進行滅菌物品的材質、性狀和污染狀況等,對照射的總線量進行調節,以達到滅菌的目地。   

       

      2、紫外線滅菌法,是利用照射紫外線殺滅微生物的一種方法。本辦法主要用于玻璃制品、金屬制品、橡膠制品、塑料制品和纖維制品等,還可用于設施、設備、水或醫藥品等。通常,一般應用200—300nm的紫外線。   

       

      3、高頻滅菌法,是直接用照射高頻發熱殺滅微生物的一種方尖。本辦法主要用于水、培養基、試驗液體和液狀的醫藥品等耐受高頻照射的物品。通常采用915或2450兆周的頻率。

       

      四、化學滅菌法

       

      1、氣體滅菌法,利用環氧乙烷或甲醛殺滅微生物的一種方法。本辦法,主要用于玻璃制品、磁制品、金屬制品、橡膠制品、塑料制品、纖維制品等,用于設施、設備或粉末狀的醫藥品等,使用氣體滅菌時,其被滅菌的物品以未變質為前提條件。   

       

      2、藥液滅菌法,是用藥液殺滅微生物的方法。本辦法主要用于玻璃制品、磁制品、金屬制品、橡膠制品、塑料制品、纖維制品等物品的滅菌,還可用于手指、無菌箱或無菌設備等的消毒,藥液滅菌用于未變質的物品。通常使用的有乙醇(灑精)0.1—1w/v%鹽化苯類溶液、甲酚、苯酚水或福爾馬林水等。

       

      無菌操作

       

      將以上已經使用過的器具或材料在滅菌后,應在無菌箱或無菌設備內進行無菌操作。以上各種滅菌方法,主要用于醫藥品的調配、充填、密封等工藝性的操作,操作速度要快。

       

      滅菌參數

       

      滅菌設備的驗證是通過有關參數對滅菌方法進行可靠性驗證的。   

       

      1、D值

       

      D值是指在一定溫度下,殺滅90%微生物(或殘存率為10%)所需的滅菌時間。在一定滅菌條件下,不同微生物具有不同的D值;同一微生物在不同滅菌條件下,D值亦不相同。因此D值隨微生物的種類、環境和滅菌溫度變化而異。   

       

      2、Z值   

      Z值是指滅菌時間減少到原來的1/10所需升高的溫度或在相同滅菌時間內,殺滅99%的微生物所需提高的溫度。  

       

      3、F值   

      F值為在一定溫度(T)下,給定Z值所產生的滅菌效果與在參比溫度(T0)下給定Z值所產生的滅菌效果相同時所相當的滅菌時間,以min為單位。F值常用于干熱滅菌。   

       

      4、F0值   

      F0值為一定滅菌溫度(T)下,Z為10℃時所產生的滅菌效果與121℃,Z值為10℃所產生的滅菌效果相同時所相當的時間(min)。也就是說,不管溫度如何變化,t分鐘內的滅菌效果相當于在121℃下滅菌F0 分鐘的效果。F0目前僅應用于濕熱滅菌。

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